Inhibitory Effect of Water Extract from Stephania venosa Tubers on Serotonin Receptors Expressed in Xenopus Oocytes

Abstract

AbstractObjectives: This study aimed to evaluate inhibitory effects of water extract from Stephania venosa (S. venosa) tubers on serotonin (5-HT), N-methyl Daspartate (NMDA) and glycine receptors expressed in Xenopus oocytes.Method: Xenopus oocytes were injected with RNA of either 5-HT, NMDA or glycine receptor and transmembrane currents were recorded using the two-electrode voltage clamp technique. Results: The extract markedly inhibited 5-HT receptors when oocytes were pretreated with the extract. IC50 values of the extract were 3 and 60 μg/ml when oocytes were and were not pretreated, respectively. The extract (1 μg/m ) caused a rightward shift of the 5-HT concentration-response curve. ED50 values of 5-HT were 0.1 and 1 μM in the absence and presence of the extract, respectively. Inhibitory effect of the extract (0.1 – 1,000 μg/ml) on NMDA and glycine receptors was less potent than that on the 5-HT receptors. Conclusion: These results suggest that the extract inhibited the 5-HT receptor by interacting with 5-HT binding site in a competitive fashion. Moreover, the inhibition of the extract was more specific to 5-HT receptor than NMDA and glycine receptors. Possible active compound (s) underlying the inhibitory effect of the extract are dis ussed.Key words: Stephania venosa tubers, Xenopus oocytes, 5-HT receptor บทคัดย่อวัตถุประสงค์: เพื่อศึกษาฤทธิย์ ับยัง้ รีเซพเตอร์ serotonin (5-HT), N-methyl Daspartate(NMDA) และ glycine ของสารสกัดน้ำจากหัวบอระเพ็ดพุงช้าง(Stephania venosa) โดยใช้แบบจำลองของไข่กบ Xenopus วิธีการศึกษา: ฉีดRNA ที่มีรหัสพันธุกรรมของรีเซพเตอร์ 5-HT หรือ NMDA หรือ glycine เข้าไปในไข่กบ Xenopus แล้ววัดการเปลี่ยนแปลงกระแสไฟฟ้าภายในไข่กบด้วยวิธี twoelectrodevoltage clamp ผลการศึกษา: พบว่าสารสกัดสามารถยับยัง้ รีเซพเตอร์5-HT ได้อย่างชัดเจนเมื่อไข่สัมผัสกับสารสกัดก่อน ค่า TD50 ของสารสกัดเท่ากับ 3และ 60 ไมโครกรัม/มิลลิลิตรเมื่อไข่สัมผัสและไม่ได้สัมผัสกับสารสกัดก่อนตามลำดับ สารสกัด (1 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร) ทำให้กราฟความสัมพันธ์ระหว่างความเข้มข้นของสารสกัดกับการตอบสนองของรีเซพเตอร์ 5-HT เคลื่อนไปทางขวา ค่า ED50 ของ 5-HT เท่ากับ 0. 1 และ 1 ไมโครโมล เมื่อไม่มีและมีสารสกัดตามลำดับ ฤทธิใ์ นการยับยัง้ ของสารสกัด (0.1 – 1,000 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร)ต่อรีเซพเตอร์ NMDA และ glycine มีความแรงน้อยกว่าฤทธิใ์ นการยับยัง้ รีเซพเตอร์ 5-HT สรุป: จากผลการวิจัยครัง้ นี้บ่งชี้ว่า สารสกัดยับยัง้ รีเซพเตอร์ 5-HTโดยการจับกับรีเซพเตอร์ตรงตำแหน่งเดียวกันกับที่ 5-HT เข้าไปจับ และฤทธิใ์ นการยับยัง้ มีความจำเพาะต่อรีเซพเตอร์ 5-HT มากกว่ารีเซพเตอร์ NMDA และglycine มีการวิเคราะห์เกี่ยวกับชนิดของสารออกฤทธิท์ ี่เป็นไปได้ ที่ทำให้สารสกัดแสดงฤทธิย์ ับยังคำสำคัญ: หัวบอระเพ็ดพุงช้าง, ไข่กบ Xenopus, รีเซพเตอร์ 5-HT